Клинико диагностическое значение определения липопротеинов. Липопротеиды: функции, значение и классификация
Липопротеины крови, в силу своих биохимических свойств ─ это главная форма транспортировки триглицеридов и эфиров холестерина в нашем организме. Жиры, в силу своей гидрофобности, не могут перемещаться по организму без специальных переносчиков.
- Разновидности переносчиков липидов
- Состав молекулы липопротеина
- Пути преобразований различных транспортных форм липидов в организме
- Причины дисбаланса липопротеинов
- Если выявлен липидный дисбаланс
Баланс жиров определяется соотношением между атерогенными и антиатерогенными переносчиками жиров. В случае его нарушения, липиды откладываются в стенках артерий, с последующим формированием холестериновых отложений, постепенно уменьшающих просвет сосудов.
Разновидности переносчиков липидов
Классификация липопротеинов включает в себя пять основных фракций:
- Липопротеины с очень низкой плотностью (ЛПОНП).
- Липопротеины с промежуточной плотностью (ЛППП).
- Липопротеины с низкой плотностью (ЛПНП).
- Липопротеины с высокой плотностью (ЛПВП, называются также альфа антиатерогенными липопротеинами).
- Хиломикроны.
С использованием специальных лабораторных методик удается выделить еще до 15-17 фракций переносчиков жиров крови.
Все перечисленные транспортные формы находятся в тесной взаимосвязи друг с другом, они взаимодействуют между собой и могут преобразовываться друг в друга.
Состав молекулы липопротеина
Липопротеины плазмы крови представлены шарообразными белковыми молекулами, чьей непосредственной функцией в организме является транспортная ─ они осуществляют перенос по кровотоку молекул холестерина, триглицеридов и других липидов.
Липопротеины различаются по величине, плотности, свойствам и выполняемым функциям. Строение их представлено сферическими структурами, в центре которых находятся триглицериды и этерифицированный холестерин, составляя, так называемое, гидрофобное ядро. Вокруг ядра располагается растворимый слой из фосфолипидов и апобелков. Последние являются агентами взаимодействия со многим рецепторами и обеспечивают выполнение липопротеинами их функций.
Существует несколько видов апобелков:
- Апобелок А1 ─ обеспечивает возвращение холестерина из тканей в печень, помощью этого апобелка лишний холестерин подвергается утилизации. Является основным компонентом ЛПВП.
- Апобелок B ─ главный компонент ХМ, ЛПОНП, ЛПНП и ЛППП. Обеспечивает способность указанных переносчиков передавать жиры тканям.
- Апобелок С ─ структурный компонент ЛПВП.
Пути преобразований различных транспортных форм липидов в организме
Хиломикроны ─ крупные комплексы, формирующиеся в кишечнике из усвоенных жирных кислот и холестерина. Прежде чем попасть в общий кровоток, они проходят по лимфатическим сосудам, где происходит присоединение к ним необходимых апобелков. В крови хиломикроны быстро подвергаются расщеплению под влиянием специфического фермента (липопротеидлипаза), находящегося в эндотелии стенок сосудов, при этом освобождается большое количество жирных кислот, которые поглощаются тканями. От хиломикронов в этом случае остаются продукты деградации, перерабатываемые печенью.
Продолжительность жизни этих транспортных форм жиров колеблется от нескольких минут до получаса.
Липопротеины очень низкой плотности синтезируются печенью, главной их функцией является транспорт большинства образованных эндогенно триглицеридов. Покинув печень они принимают на свою поверхность апобелки (апоА, апоС, апоЕ и другие) от ЛПВП. При гиперлипидемии в печени обычно образуется больше ЛПОНП, чем требуется. Кроме того, повышенный уровень ЛПОНП является признаком инсулинорезистентности. Время жизни ЛПОНП составляет в среднем 6-8 часов. Также, как и хиломикроны, липопротеины этого класса обладают сродством к эндотелию сосудов мышечной и жировой ткани, необходимым для того, чтобы передать транспортируемые ими жиры. Когда ЛПОНП в процессе липолиза теряют основную часть, состоявшую в основном из триглицеридов своего ядра, они уменьшаются в размерах и становятся липопротеинами промежуточной плотности.
Транспортеры с промежуточной плотностью не всегда являются результатом деградации липропротеинов очень низкой плотности, часть их поступает из печени. Они могут быть различного состава в зависимости от имеющегося уровня этерифицированного холестерина и триглицеридов.
Липопротеины с низкой плотностью существуют в крови до 10 часов. Могут образовываться в печени, могут быть продуктом липолиза ЛППП. Холестерин у липопротеидов низкой плотности переносится нуждающимся в жирах периферическим тканям. Также они вместе с ЛПОНП играют значительную роль в развитии атеросклероза.
Липопротеины с высокой плотностью могут существовать до 5 суток.
Они занимаются тем, что захватывают излишки холестерина из тканей и у липопротеинов других фракций и переносят его в печень для переработки и выведения из организма. Внутри ЛПВП также есть несколько подфракций. Печень ─ место их образования, они синтезируются там независимо от других липопротеинов и обладают уникальным набором апобелков на своей поверхности. Эта группа переносчиков липидов рассматривается как антиатерогенная. Проявляют антиоксидантные и противовоспалительные свойства.
Вся биохимия преобразований переносчиков жиров в крови была бы невозможна без капилляров, в эндотелии которых содержится липопротеидлипаза, подвергающая гидролизу триглицериды, находящиеся в составе ХМ, ЛПОНП, ЛПНП.
Причины дисбаланса липопротеинов
Среди основных причин, по которым нарушается равновесие в жировом обмене, следующие:
- Главным потребителем свободных жирных кислот, поставляемых атерогенными ЛПОНП и ЛПНП, являются мышцы. А значит, уменьшение физической активности является одним из мощных факторов риска нарушения обмена жиров и появления атеросклеротических поражений сосудов.
- Также немаловажным фактором является хронический стресс. Изучено, что во время стресса в крови поддерживается повышенная концентрация кортизола, в то время, как анаболический гормон инсулин снижен. На этом фоне обычно регистрируется повышение всех составляющих липидного обмена, а значит более высокий риск заболеваний сердечно-сосудистой системы.
- Неправильное питание (обилие жиров в рационе).
- Вредные привычки (особенно курение).
- Лишний вес.
- Генетическая предрасположенность.
- Артериальная гипертензия.
- Сахарный диабет и другие эндокринопатии.
- Заболевания печени и почек.
- Прием некоторых лекарственных средств.
Если выявлен липидный дисбаланс
Врачи, определяя отношение атерогенные липопротеины и антиатерогенных переносчиков жиров, определяют и так называемый коэффициент атерогенности. С его помощью можно оценить риск прогрессирования атеросклеротических поражений у каждого конкретного пациента.
Главной целью для врача при лечении пациента является контроль за холестерином в крови, а также правильным отношением отдельных фракций транспортных форм жиров.
Для этого применяются методы медикаментозной коррекции, но крайне важное место занимает непосредственное участие самого пациента в улучшении своего самочувствия и дальнейшего прогноза ─ изменение образа жизни и питания, борьба с хроническим стрессом. Пациент должен понимать, что победа над болезнью возможна только в том случае, если он не будет занимать нейтральную позицию, а примет сторону лечащего доктора.
В крови представлены все фракции липидов, которые содержатся в тканях человека. Содержание в плазме отдельных липидов колеблется в широких пределах и зависит от характера пищи и от времени взятия крови на анализ. Липиды крови находятся в основном в составе ЛП – комплексов липидов со специфическими белками, известными как аполипопротеины (апобелки) различных классов. Сердцевина липопротеидной частицы образована неполярными липидами – триглицеридами и эфирами ХС. Снаружи липопротеидная частица окружена поверхностным монослоем фосфолипидов, в который включен свободный ХС. На поверхности липопротеидных частиц расположены апопротеины.
Различают четыре основных класса ЛП, транспортирующих липиды в периферические ткани.
1. Хиломикроны (ХМ), переносящие экзогенные, т.е. пищевые жиры из кишечника.
2. Липопротеиды очень низкой плотности (ЛПОНП), переносящие эндогенные триглицериды (ТГ) и ХС из печени.
3. Липопротеиды низкой плотности (ЛПНП), транспортирующие ХС из печени.
4. Липопротеиды высокой плотности (ЛПВП), возвращающие ХС из внепеченочных тканей в печень, откуда он может выводиться в кишечник.
Все эти частицы находятся в динамическом равновесии, и между ними происходит интенсивный обмен липидами и белками.
ХМ имеют самую низкую плотность, содержат всего 2% белка, образуются из пищевых жиров в энтероцитах, откуда они попадают в лимфатическую систему и через грудной проток достигают системы кровообращения. ТГ составляют примерно 90% липидов, они освобождаются из ХМ под действием фермента липопротеидлипазы, расположенной на внутренней поверхности эндотелия капилляров жировой ткани, скелетных и сердечной мышц. По мере удаления ТГ из ХМ, последние становятся меньше; фосфолипиды и белки освобождаются с поверхности частиц и поглощаются ЛПВП. Остатки (ремнанты) ХМ удаляются из циркуляции клетками печени.
ЛПОНП (пре-b-ЛП) образуются из ТГ, синтезированных в печени, содержат ХС и фосфолипиды. В крови под действием липопротеидлипазы ТГ разрушаются до глицерина и жирных кислот, а ЛПОНП превращаются в ЛПНП. ЛПНП (b-ЛП) являются главными переносчиками ХС в форме его эфиров. ЛПНП связываются со своими рецепторами на клеточных мембранах, происходит их интернализация в клетку, разрушение их в лизосомах и освобождение ХС. Рецепторы ЛПНП насыщаемы и являются объектом регуляции. ЛПНП могут поглощаться макрофагами и гладкомышечными клетками в стенке артерий и аорты (туда ЛПНП поступают путем эндоцитоза). Это является важным звеном в патогенезе атеросклероза. Когда клетки перегружаются ХС, они превращаются в пенистые клетки – классический компонент атероматозных бляшек.
ЛПВП (a-ЛП) синтезируются в печени и в меньшей степени в клетках тонкого кишечника. Содержат 50% белка и 27% фосфолипидов. С ЛПВП связан фермент лецитин-холестеролацилтрансфераза, который переводит свободный ХС в эфиры ХС. Они перемещаются внутрь частицы, и это способствует более интенсивному захвату ХС из стареющих клеток и других ЛП. ЛПВП поглощаются печенью и таким образом опосредуют обратный транспорт ХС в печень.
При атеросклерозе наблюдается снижение содержания ХС во фракции ЛПВП и увеличение ХС в ЛПОНП и ЛПНП. Соответственно увеличивается коэффициент атерогенности (отношение разности между общим ХС и ХС ЛПВП к ХС ЛПВП). В норме это отношение должно быть не более 3 – 4.
ГИПЕРЛИПОПРОТЕИДЕМИИ подразделяют на 6 фенотипов. Они могут быть первичными (наследственными), либо вторичными (при СД, гипотиреозе, ожирении, алкоголизме, болезни почек, действии некоторых лекарств). Наиболее важна семейная гиперхолестеринемия. Другие: семейная комбинированная гиперлипидемия, семейная гипертриглицеридемия; дисбета-липопротеидемия, при которой накапливаются частицы с промежуточной плотностью между ЛПОНП и ЛПНП. Дефект синтеза апоВ-белка – абета-липопротеидемия проявляется мальабсорбцией жиров, пигментным ретинитом и атаксической невропатией.
Липопротеиды низкой плотности (ЛПНП) относятся к холестериновым фракциям с высокими уровнями атерогенности. Повышенный уровень холестерина ЛПНП и ЛПОНП свидетельствует о наличии или высоком риске развития атеросклеротического поражения сосудистых стенок, ИБС, острых инфарктов миокарда и инсультов головного мозга.
Следует отметить, что в последнее время наблюдается выраженная тенденция к омоложению сердечно-сосудистых патологий. Если раньше тяжелый атеросклероз сосудов и его осложнения развивался у пациентов старше 55-60 лет, то сейчас данная патология встречается и у 25-30 летних.
Липопротеидами низкой плотности называют фракции «плохого» холестерина, обладающих высоким уровнем атерогенности и приводящих к развитию атеросклеротического поражения сосудистых стенок. На ранних стадиях липидного дисбаланса, когда липопротеиды низкой плотности только начинают накапливаться в сосудистой интиме, ЛПВП «захватывают» и транспортируют в печень, где происходит их превращение в желчные кислоты.
Таким образом, в организме поддерживается естественный баланс липидов. Однако, при длительном увеличении уровня ЛПНП и снижении количества ЛПВП, липопротеины низкой плотности не только накапливаются в стенке сосуда, но и провоцируют развитие воспалительной реакции, сопровождающейся разрушением эластиновых волокон, с последующим замещением их ригидной соединительной тканью.
Чем опасен высокий уровень ЛПНП?
Прогрессирование атеросклероза сопровождается значительным снижением эластичности сосудистой стенки, нарушением способности сосуда растягиваться током крови, а также сужение просвета сосуда за счет увеличения в размерах атеросклеротической бляшки (скопления ЛПНП, ЛПОНП, и т.д.). Все это приводит к нарушению кровотока, усилению образования микротромбов и нарушению микроциркуляции.
В зависимости о расположения очага атеросклеротического поражения сосудов, развиваются симптомы:
- ИБС (атеросклероз коронарных сосудов);
- ИНК (ишемия нижних конечностей из-за атеросклеротического поражения сосудов ног и брюшной аорты);
- ишемии головного мозга (сужение просвета сосудов шеи и мозга) и т.д.
В каких случаях назначают диагностику ЛПНП?
Уровень ЛПНП и риск развития заболеваний сердца и сосудов имеет прямую взаимосвязь. Чем выше в крови уровень липопротеидов низкой плотности, тем выше вероятность развития у пациента тяжелых патологий сердечно-сосудистой системы.
Проведение регулярного анализа крови на ЛПНП позволяет вовремя обнаружить нарушения липидного баланса и подобрать пациенту гиполипидемическую диету и, при необходимости, схему медикаментозной коррекции уровня холестерина.
Данный анализ рекомендовано раз в год проходить всем людям старше 35-ти лет. При наличии факторов риска по развитию сердечно-сосудистых заболеваний, профилактическое обследование может проводиться чаще. Также анализ показан при наличии у пациента:
- ожирения;
- сахарного диабета;
- заболеваний печени;
- патологий щитовидной железы;
- хронического панкреатита и холецистита;
- жалоб на одышку, постоянную мышечную слабость, быструю утомляемость, головокружение, снижение памяти;
- жалоб на боли в ногах, усиливающиеся при ходьбе, перемещающуюся хромоту, постоянную зябкость стоп и кистей, бледность или покраснение голеней и т.д.
Липопротеины низкой плотности в анализе крови также оценивают при беременности. Следует отметить, что умеренное повышение уровня холестерина во время вынашивания ребенка является нормальным и не требует лечения. Однако при значительном увеличении уровня липопротеинов низкой плотности увеличивается риск самопроизвольного аборта, нарушения фето-плацентарного кровотока, замирания беременности, задержки внутриутробного развития плода, преждевременных родов и т.д.
Пониженные уровни холестерина ЛПНП и ЛПВП во время беременности также может свидетельствовать о высоких рисках развития поздних токсикозов, а также кровотечения в родах.
Факторы риска развития атеросклероза и патологий сердечно-сосудистой системы
Как правило, холестерин ЛПНП повышен у:
- курильщиков;
- пациентов, злоупотребляющих спиртными напитками, жирными, жареными и копчеными продуктами, сладостями, мучным и т.д.;
- пациентов с ожирением, сахарным диабетом;
- лиц, ведущих малоподвижный образ жизни;
- пациентов, страдающих от бессонницы и частых стрессов;
- больных, с отягощенным семейным анамнезом (родственники с ранними сердечно-сосудистыми патологиями).
Также ЛПНП в крови повышаются при наличии хронических патологий печени, поджелудочной, авитаминозов, наследственных нарушений липидного баланса и т.д.
Показания к проведению анализа на липопротеины низкой плотности
Липидный профиль оценивают:
- для подтверждения или опровержения наличия атеросклеротического поражения сосудов;
- при комплексном обследовании пациентов с заболеваниями печени, поджелудочной железы, желтухами, а также патологиями эндокринной системы;
- при обследовании больных с подозрением на наследственные нарушения липидного баланса;
- для оценивания рисков формирования ИБС и определения коэффициента атерогенности.
Расчет коэффициента атерогенности применяют для оценивания соотношения количества общего холестерина (ОХ) и липопротеинов высокой плотности, а также риска развития тяжелого атеросклеротического поражения сосудов. Чем выше коэффициент, тем выше риск.
Коэффициент атерогенности = (ОХ-ЛПВП)/ЛПВП.
В норме, соотношение ЛПВП и общего холестерина (ЛПНВ+ЛПОНП и ЛПВП) находится в пределах от 2 до 2.5 (максимально допустимы показатели для женщин -3.2, а для мужчин — 3.5).
Норма липопротеидов низкой плотности
Нормы содержания ЛПНП зависят от пола пациента и его возраста. Норма ЛПНП в крови у женщин во время беременности повышается в зависимости от срока вынашивания ребенка. Также возможна незначительная разница показателей при сдаче анализов в разных лабораториях (это обусловлено разницей в оборудовании и используемых реактивах). В связи с этим, оценка уровня ЛПНП в крови должна проводиться исключительно специалистом.
Как сдавать анализ на холестерин ЛПНП?
Забор крови должен производиться утром, на голодный желудок. За полчаса до анализа запрещено курить. Также исключается физическая и эмоциональная нагрузка.
За неделю до исследования необходимо исключить прием алкоголя и пищи, богатой холестерином.
ЛПНП норма у мужчин и женщин
Половые различия в анализах обуславливаются разницей в гормональном фоне. У женщин до наступления менопаузы высокий уровень эстрогенов снижает холестерин ЛПНП в крови. Это способствует формированию естественной гормональной защиты от атеросклероза и сердечно-сосудистых патологий. У мужчин, за счет превалирования андрогенов, уровень ЛПНП в крови несколько выше, чем у женщин. Поэтому они у них значительно чаще встречается выраженный атеросклероз в раннем возрасте.
Уровень холестерина ЛПНП в таблице по возрастам для мужчин и женщин:
| Возраст пациента | Пол | ЛПНП, ммоль/л |
| От 5-ти до 10-ти | М | 1,63 — 3,34 |
| Ж | 1,76 — 3,63 | |
| От 10-ти до 15-т | М | 1,66 — 3,44 |
| Ж | 1,76 — 3,52 | |
| От 15-ти до 20-ти | М | 1,61 — 3,37 |
| Ж | 1,53 — 3,55 | |
| От 20-ти до 25-ти | М | 1,71 — 3,81 |
| Ж | 1,48 — 4,12 | |
| От 25-ти до 30-ти | М | 1,81 — 4,27 |
| Ж | 1,84 — 4,25 | |
| От 30-ти до 35-ти | М | 2,02 — 4,79 |
| Ж | 1,81 — 4,04 | |
| От 35-ти до 40-ка | М | 2,10 — 4,90 |
| Ж | 1,94 — 4,45 | |
| От 40-ка до 45-ти | М | 2,25 — 4,82 |
| Ж | 1,92 — 4,51 | |
| От 45-ти до 50-ти | М | 2,51 — 5,23 |
| Ж | 2,05 — 4,82 | |
| От 50-ти до 55-ти | М | 2,31 — 5,10 |
| Ж | 2,28 — 5,21 | |
| От 55-ти до 60-ти | М | 2,28 — 5,26 |
| Ж | 2,31 — 5,44 | |
| От 60-ти до 65-ти | М | 2,15 — 5,44 |
| Ж | 2,59 — 5,80 | |
| От 65-ти до 70-ти | М | 2,54 — 5,44 |
| Ж | 2,38 — 5,72 | |
| Более 70-ти | М | 2,28 — 4,82 |
| Ж | 2,49 — 5,34 |
Что это значит, если липопротеиды низкой плотности повышены
Холестерин ЛПНП повышен у пациентов с:
- различными наследственными нарушениями баланса липидов (гиперхолестеринемии и гипертриглицеридемии);
- избыточной массой тела;
- тяжелыми почечными патологиями (наличие нефротического синдрома, почечной недостаточности);
- желтухой, обтурационного характера;
- эндокринными патологиями (сахарный диабет, состояния гипотиреоза, заболевания надпочечников, синдром поликистозных яичников и т.д.);
- нервным истощением.
Причиной ложно повышенного холестерина низкой плотности в анализах может быть прием различных препаратов (бета-блокаторов, диуретических средств, глюкокортикостероидных гормонов и т.д.).
Холестерин ЛПНП понижен
Сниженный уровень ЛПНП может наблюдаться у больных с наследственными гиполипидемиями и гипотриглицеридемиями, хроническими анемиями, нарушением всасывания в кишечнике (мальабсорбция), миеломной болезнью, тяжелыми стрессами, хроническими патологиями респираторного тракта и т.д.
Также к уменьшению уровня липидов приводит прием препаратов холестирамина ® , ловастатина ® , тироксина ® , эстрогенов и т.д.
Как понизить уровень холестерина ЛПНП в крови
Всю гиполипидемическую терапию должен назначать лечащий врач на основании результатов анализов. Как правило, назначаются препараты статинов (ловастатин ® , симвастатин ®), секвестрантов желчных кислот (холестирамин ®), фибратов (клофибрат ®) и т.д.
Как снизить ЛПНП холестерин без лекарств?
Диета и коррекция образа жизни проводятся как обязательное дополнение к медикаментозной терапии. В качестве самостоятельных методов лечения они могут использоваться только на ранних стадиях атеросклероза.
Методы определения общего холестерина подразделяются на:1) колориметрические. Насчитывается около 150 колориметрических методов, основывающихся на реакциях образования цветных комплексов;
2) нефелометрические методы, основанные на сравнении степени мутности стандартного и исследуемого раствора;
3) титрометрические методы;
4) флюориметрические методы, позволяющие определять холестерин в микрообъемах сыворотки крови (например, в 0,01 мл ее);
5) газохроматографические и хроматографические методы;
6) гравиметрические методы.
Метод определения общего холестерина в сыворотке крови, основанный на реакции Либермана-Бурхарда (метод Илька)
Принцип метода
В сильнокислой безводной среде ХС взаимодействует со смесью серной, уксусной кислот и уксусного ангидрида. В ходе реакции ХС последовательно окисляется. При этом каждая стадия реакции сопровождается образованием молекулы ХС, которая имеет на одну двойную связь больше, чем соединение, из которого она образовалась.
В результате конечного окисления иона 3,5-холестодиена получается окрашенное соединение, растворенное в серной кислоте и дающее максимум абсорбции при 410 и 610 нм. Из-за неустойчивости окраски соединения время фотометрирования должно быть точно выдержано.
Реакционная смесь со стандартным раствором ХС имеет изумрудный цвет. Однако пробы сыворотки могут давать зеленый, голубой, бурый цвета. Это связано с тем, что в результате образования эндогенного тепла в реакцию вступают многие компоненты сыворотки крови. Кроме того, в реакции Либермана-Бурхарда свободный ХС и его эфиры образуют цветные комплексы с разным коэффициентом молекулярного поглощения. В случае высокого содержания эфиров ХС оптическая плотность оказывается более высокой. Поскольку на прямое определение ХС влияют многие факторы, реакцию ХС со смесью Либермана-Бурхарда нельзя считать специфичной.
Прямой метод определения ХС относительно прост в исполнении и недорог. Однако токсичность и способность вызывать коррозию системы в современных анализаторах ограничивают применение метода.
В крупных лабораториях предпочтение отдают ферментативным методам определения ХС.
Референтные величины: холестерин 4,65-6,46 ммоль/л (180-250 мг/дл).
При концентрации холестерина в пробе выше 16 ммоль/л сыворотку разводят физиологическим раствором в соотношении 1: 1 (результат).
Реакция чувствительна на изменение температуры, поэтому необходимо особенно соблюдать охлаждение реакционной смеси после добавки серной кислоты.
Билирубин в концентрации выше 50 мкмоль/л влияет на результат анализа. Интерференцию билирубина можно исправить расчетом. Содержание 17 мкмоль/л билирубина приводит к завышению содержания холестерина в сыворотке примерно на 0,1 моль/л.
Сыворотка должна быть негемолизированной.
Необходимые реактивы
1. Ледяная уксусная кислота.
2. Концентрированная серная кислота.
3. Уксусный ангидрид.
4. Абсолютный этиловый спирт.
5.
Кислотная смесь: в сухую колбу наливают 10 мл ледяной уксусной кислоты и 50 мл уксусного ангидрида, затем при постоянном перемешивании и охлаждении добавляют 10 мл концентрированной серной кислоты. Смесь должна быть бесцветной или слегка желтоватой. Хранить в холодильнике в темной склянке с притертой пробкой.
6. Калибровочный раствор: 232 мг холестерина растворяют в 2-3 мл хлороформа и доводят до объема 100 мл абсолютным этиловым спиртом. Приготовленный раствор содержит холестерин в концентрации 6 ммоль/л.
Ход определения
К 2,1 мл кислотной смеси медленно по стенке пробирки добавляют 0,1 мл плазмы или сыворотки без признаков гемолиза, перемешивают встряхиванием и ставят на 20 мин в термостат или водяную баню при температуре 37 °С, затем фотометрируют в кювете с длиной оптического пути 0,5 см против реактива при длине волны 625 нм.
Построение калибровочной кривой и расчет. К 0,05-0,2 мл калибровочного раствора добавляют такое количество кислотной смеси, чтобы общий объем был 2,2 мл, перемешивают и выдерживают 20 мин при температуре 37 °С, так же как и опытные пробы, а затем фотометрируют.
Окраска калибровочной пробы, в которую взято 0,05 мл калибровочного раствора, соответствует содержанию холестерина в плазме 3 ммоль/л, пробы, в которую взято 0,1 мл, - содержанию 6 ммоль/л и т.д.
Примечания
1. Попадание воды приводит к помутнению раствора.
2. Следы гемолиза или желтушность исследуемой плазмы или сыворотки служат причиной завышенных результатов.
3. Можно использовать для фотометрии и кюветы с длиной оптического пути 1 см, тогда количество кислотной смеси удваивают, а количество исследуемого материала остается прежним.
Метод определения содержания холестерина в сыворотке крови, основанный на холестеролоксидазной реакции
Принцип метода
Холестерин и его эфиры выделяются из липопротеинов детергентами. Холестеринэстераза гидролизует эфиры. В результате последующего ферментативного окисления холестерина холестериноксидазой образуется Н2О2.
Эфир холестерина + Н2О2 ↔ холестерин + жирные кислоты;
Холестерин + О2 ↔ холестен-3-ОН + Н2О2;
Н2О2 + n-хлорфенол + 4-аминоантипирин ↔ хинониминовый краситель + Н2О2.
Уровни нормы ХС, выявленные при обследовании “в целом здорового населения”, относительно высоки. С точки зрения риска развития ишемической болезни сердца уровни ХС желательны:
2) умеренный риск - 5,18-6,19 ммоль/л;
3) высокий риск - более 6,22 ммоль/л.
Клинико-диагностическое значение
Увеличение концентрации ХС наблюдается при полигенной гиперлипопротеидемии типа II А и II Б, III, гиперлипопротеидемии I, IV, V типов, вторичной, приобретенной гиперлипопротеидемии, отмечается также при заболеваниях печени, внутри- и внепеченочном холестазе, гломерулонефрите, нефротическом синдроме, ХПН, злокачественных опухолях поджелудочной железы, простаты, гипотиреозе, подагре, ИБС, беременности, диабете, алкоголизме, анальбуминемии, дисглобулинемии, острой перемежающейся порфирии.
Снижение концентрации холестерина обнаружено при дефиците α-липопротеида (болезнь Танжера), гипо- и а-β-липопротеидемии, некрозе печеночных клеток, злокачественных опухолях печени, гипертиреозе, нарушении всасывания, нарушении питания, мегалобластной анемии, сидеробластной анемии, талассемии, острых тяжелых заболеваниях, обширных ожогах, хронических обструктивных заболеваниях легких, умственной отсталости, ревматоидном артрите, лимфангиоэктазии кишечника.
Отмечены сезонные колебания уровня ХС, более высокие осенью и зимой, более низкие весной и летом. Повторное определение ХС после инфаркта миокарда необходимо проводить через три месяца.
Метод определения содержания липопротеинов высокой плотности в сыворотке крови
Липопротеины очень низкой плотности (ЛПОНП) и низкой плотности (ЛПНП) в противоположность липопротеинам высокой плотности (ЛПВП) образуют нерастворимые комплексы с гепарином в присутствии ионов марганца. В надосадочной жидкости, оставшейся после осаждения ЛПНП и ЛПОНП, остается α-холестерин или ЛПВП.
Нормальное содержание ХС ЛПВП в сыворотке крови составляет 0,9-1,9 ммоль/л.
Принцип метода
Хиломикроны, ЛПОНП (липопротеины очень низкой плотности) и ЛПНП (липопротеины низкой плотности) осаждаются добавлением фосфорно-вольфрамовой кислоты и хлорида магния.
После центрифугирования супернатант содержит ЛПВП (липопротеины высокой плотности) - фракцию, содержание холестерина в которой определяется ферментативно.
Полученные значения достоверны, если:
1) в пробе нет хиломикронов;
2) концентрация триацилглицеридов не превышает 400 мг/100 мл;
3) в пробах не обнаруживается следов III типа дислипопротеинемии.
При измерении на Hg 546 нм происходит завышение количества ЛПВП холестерина спектром поглощения гемоглобина, которое можно игнорировать при значениях до 200 мг Нb/100 мл.
Полученный при центрифугировании супернатант должен быть прозрачен. Если проба содержит большое количество триглицеридов (более 1000 мг/100 мл), осаждение липопротеинов может быть неполным (мутный супернатант) или часть осадка может плавать на поверхности. В этих случаях развести образец 1: 1 0,9%-ным раствором NaCl и повторить осаждение.
Клинико-диагностическое значение ХС-ЛПВП
Эпидемиологические исследования показали обратную зависимость между уровнями ХС-ЛПВП и распространенностью ИБС. Определение ХС-ЛПВП способствует выявлению риска развития ИБС.
Повышению уровня ХС-ЛПВП способствуют такие заболевания, как первичный билиарный цирроз, хронический гепатит, алкоголизм, прочие хронические интоксикации.
Холестерин является липопротеином, и в организме человека присутствует в крови и в мембранах клеток. Холестерин крови представлен эфирами холестерина, а в мембранах – свободный холестерин. Холестерин является жизненно необходимым веществом, так как участвует в образовании желчи, половых гормонов, придает твердость мембране клеток. Мнение о том, что холестерин = вред, является ошибочным. Более опасным для организма является недостаток холестерина, нежели его избыток. Однако избыточное количество холестерина в крови является предпосылкой для развития такого заболевания как атеросклероз . Поэтому определение холестерина является маркером развития атеросклероза.
Как сдать анализ крови на холестерин?
Для определения показателей липидограммы используется кровь из вены, взятая утром, натощак. Подготовка к сдаче анализа обычная – воздержание от пищи в течение 6-8 часов, избегание физических нагрузок и обильной жирной пищи. Определение общего холестерина проводят унифицированным международным методом Абеля или Илька. Определение фракций проводят методами осаждения и фотометрии, которые довольно трудоемки, однако точны, специфичны и достаточно чувствительны.Автор предупреждает, что показатели нормы даны усредненные, и в каждой лаборатории могут отличаться. Материал статьи следует использовать как справочный и не предпринимать попыток самостоятельно поставить диагноз и начать лечение.
Липидограмма – что это?
Сегодня определяют концентрацию следующих липопротеинов крови:
- Общий холестерин
- Липопротеины высокой плотности (ЛПВП или α-холестерин),
- Липопротеины низкой плотности (ЛПНП бета холестерин).
- Триглицериды (ТГ)
ЛПВП – напротив, являются антиатерогенной фракцией, так как снижают риск развития атеросклероза.
Триглицериды являются транспортной формой жиров, поэтому их высокое содержание в крови также приводит к риску развития атеросклероза. Все эти показатели в совокупности или по отдельности используются для диагностики атеросклероза, ИБС, также для определения группы риска по развитию данных заболеваний. Также используют в качестве контроля за лечением.
Подробнее об ишемической болезни сердца читайте в статье: Стенокардия
«Плохой» и «хороший» холестерин – что это?
Разберем подробнее механизм действия фракций холестерина. ЛПНП называют «вредным» холестерином, так как именно он приводит к образованию на стенках сосудов атеросклеротических бляшек, которые мешают кровотоку. В результате из-за этих бляшек возникает деформация сосуда, его просвет суживается, и кровь не может свободно проходить ко всем органам, в результате развивается сердечно-сосудистая недостаточность.ЛПВП, напротив, «хороший» холестерин, который убирает со стенок сосудов атеросклеротические бляшки. Поэтому более информативно и правильно определять фракции холестерина, а не только общий холестерин. Ведь общий холестерин складывается из всех фракций. Например, концентрация холестерина у двух людей равна 6 ммоль/л, но у одного из них 4 ммоль/л приходится на ЛПВП, а у другого эти же 4ммоль/л приходится на ЛПНП. Конечно, человек, у которого выше концентрация ЛПВП может быть спокоен, а человек, у которого выше ЛПНП должен позаботиться о своем здоровье. Вот такая возможна разница, при, казалось бы, одинаковом уровне общего холестерина.
Нормы липидограммы - холестерина, ЛПНП, ЛПВП, триглицеридов, коэффициент атерогенности
Рассмотрим показатели липидограммы – общий холестерин, ЛПНП, ЛПВП, ТГ.Повышение уровня холестерина в крови называется гиперхолестеринемия .
Гиперхолестеринемия возникает в результате несбалансированного питания у здоровых людей (обильное употребление жирной пищи – жирного мяса, кокосового, пальмового масла) или как наследственная патология.
Норма липидов крови
Также высчитывается коэффициент атерогенности (КА), который в норме менее 3.Коэффициент атерогенности (КА)
КА показывает соотношение атерогенных и антиатерогенных фракций в крови.Как рассчитать КА?
Это сделать, просто имея результаты липидограммы, просто. Необходимо разницу между общим холестерином и ЛПВП разделить на значение ЛПВП.Расшифровка значений коэффициента атерогенности
- Если КА атеросклероза минимален.
- Если КА 3-4, то выше содержание атерогенных фракций, то имеется высокая степень вероятности развития атеросклероза и ишемической болезни сердца (ИБС),
- Если КА > 5 – говорит о том, что у человека высока вероятность атеросклероза, что существенно повышает вероятность сосудистых заболеваний сердца, головного мозга, конечностей, почек
Для того, чтобы нормализовать жировой обмен необходимо стремиться к таким показателям крови:
О чем говорят нарушения показателей липидограммы?
Триглицериды
ТГ также относят к факторам риска развития атеросклероза и ИБС (ишемическая болезнь сердца). При концентрации ТГ в крови более 2,29 ммоль/л речь идет о том, что человек уже болен атеросклерозом или ИБС. При концентрации ТГ крови в интервале 1,9-2,2 ммоль/л (пограничные значения) говорят о том, что идет процесс развития атеросклероза и ИБС, но сами эти заболевания еще не развились в полной мере. Повышение концентрации ТГ также наблюдается при сахарном диабете.ЛПНП
Концентрация ЛПНП выше 4,9 ммоль/л говорит о том, что человек болен атеросклерозом и ИБС. Если концентрация ЛПНП лежит в диапазоне пограничных значений 4,0-4,9 ммоль/л, то идет развитие атеросклероза и ИБС.ЛПВП
ЛПВП у мужчин менее 1,16 ммоль/л, а у женщин менее 0,9 ммоль/л – признак наличия атеросклероза или ИБС. При снижении ЛПВП в область пограничных значений (у женщин 0,9-1,40 ммоль/л, у мужчин 1,16-1,68 ммоль/л) можно говорить о развитии атеросклероза и ИБС. Повышение ЛПВП говорит о том, что риск развития ИБС минимальный.Об осложнении атеросклероза - инсульте читайте в статье:
